橙汁可樂能顯陽?抗原檢測操作需規(guī)范
張佳星
最近,一波腦洞清奇的操作引發(fā)圍觀——
在新冠抗原檢測板的小孔里滴入橙汁或者可樂,檢測結(jié)果竟然也能顯示“兩條線”……有謠言說吃橙子、喝可樂會(huì)影響檢測結(jié)果,也有網(wǎng)友直呼,假陽性是不是來得有些太容易了。然而,從研發(fā)人員的角度看,這些所謂的“假陽性”完全是無中生有。
“歸根結(jié)底,任何檢測產(chǎn)品要想得到確切的結(jié)果都應(yīng)該按照說明書來使用,這是一個(gè)基本常識(shí)!比A大因源中通量研發(fā)總監(jiān)徐磊告訴科技日?qǐng)?bào)記者,部分抗原檢測產(chǎn)品雖然走出了實(shí)驗(yàn)室,但是進(jìn)行檢測、驗(yàn)證的環(huán)節(jié)歸根結(jié)底是一個(gè)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)操作。
橙汁、可樂為啥能顯陽
上海市臨床檢驗(yàn)中心臨床免疫室教授朱宇清對(duì)上述操作進(jìn)行了驗(yàn)證性試驗(yàn),她發(fā)現(xiàn)有的檢測試劑盒能夠甄別出“壞試驗(yàn)”,顯示無效;有的試劑盒會(huì)被“蒙蔽”,質(zhì)控線正常,并顯示弱陽性。
究其原因,獲批上市的抗原試劑盒中使用了不同的基底成分。
那么,為什么橙汁和可樂會(huì)讓有的抗原檢測顯出假陽性呢?
真正的陽性顯色,是由于抗原檢測捕捉到了病毒的蛋白質(zhì),在檢測線處發(fā)生了抗體與病毒蛋白結(jié)合的反應(yīng),并且激發(fā)了顯色反應(yīng),質(zhì)控線和檢測線都顯色。
橙汁、可樂也能讓檢測線顯色,是因?yàn)閮煞N酸性溶液直接激發(fā)了顯色反應(yīng),使得無需病毒蛋白的存在,就能顯色。在化學(xué)反應(yīng)中,溶液體系內(nèi)的pH值至關(guān)重要,決定了離子的解離和結(jié)合。
想象一下,日常生活中把白醋加入熱牛奶會(huì)導(dǎo)致絮狀沉淀,就不難理解pH值導(dǎo)致的蛋白變性(結(jié)合在檢測板上的抗體也是一種蛋白),由于酸堿度變化改變了化學(xué)結(jié)構(gòu),繼而導(dǎo)致了其顯色反應(yīng)的進(jìn)一步發(fā)生,造成假陽性。朱宇清在其科普文章中解釋:直接將橙子汁滴入試劑板條,溶液pH值過低,以及橙汁里面有維生素C,大量還原劑容易導(dǎo)致氯金酸膠體金異常聚集,部分膠體金析出,報(bào)告假陽性。
在試劑盒的設(shè)計(jì)中,專門有一個(gè)設(shè)計(jì)避免pH值的變化,那就是緩沖溶液。這種溶液對(duì)汗液、空氣等帶來的少量pH值波動(dòng)起到“緩沖”的作用,避免整個(gè)反應(yīng)體系因微小變化引發(fā)劇烈變化,繼而對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。即便如此,緩沖溶液也“緩沖”不了人為大量酸性物質(zhì)加入帶來的對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的破壞性影響。
拒絕假陽性,抗原檢測見招拆招
為了檢測方便,抗原抗體的反應(yīng)和顯色反應(yīng)被凝集到一塊薄薄的檢測板上完成。但由于膠體金免疫層析技術(shù)采用物理吸附的方法,抗原/抗體容易從金顆粒表面脫離,標(biāo)記物不穩(wěn)定,才導(dǎo)致橙汁、可樂使得反應(yīng)環(huán)境變化,帶來假陽性。
截至4月27日,國家藥監(jiān)局已批準(zhǔn)30個(gè)新冠病毒抗原檢測試劑產(chǎn)品。所有的獲批產(chǎn)品的檢測原理可分為三種乳膠法、膠體金法、熒光免疫層析法。
三種方法的原理都是雙抗夾心法,但顯色的信號(hào)物不同。膠體金法的信號(hào)物是納米金顆粒,是可見光顏色信號(hào),通常肉眼可觀察結(jié)果;乳膠法是涂了色源,同樣也是可見光,通過肉眼觀察結(jié)果;熒光免疫層析法的信號(hào)物是熒光物質(zhì),需要給予適合的激發(fā)光才能發(fā)射出相應(yīng)的熒光,所以通常需要特定儀器觀察檢測結(jié)果,但熒光物質(zhì)相比膠體金穩(wěn)定性更高,適用于半定量檢測,所以熒光免疫層析的靈敏度相較前兩者更高。
“顯色信號(hào)物更加穩(wěn)定,將避免一些違背規(guī)范操作帶來的假陽性的發(fā)生!毙炖谡f,為了增加顯色信號(hào)物的穩(wěn)定性,華大的抗原檢測產(chǎn)品用納米微球?yàn)檩d體技術(shù),結(jié)合熒光標(biāo)記物探針,在載體和發(fā)光方面都大大提高了顯色的穩(wěn)定性。此外,檢測信號(hào)不依靠肉眼觀察,而是通過熒光識(shí)別設(shè)備進(jìn)行定量,因此提供的信息更具診斷價(jià)值,且較傳統(tǒng)的膠體金層析檢測技術(shù)靈敏度高約10倍。
可見,并非抗原檢測容易“假陽性”,明明是操作出格,別讓橙子、可樂再背鍋了。
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